Руководство по хроматографическим профилям часть 1 Подготовка хроматографических профилей для представления в стандартах
|
Масла эфирные ОБЩЕЕ РУКОВОДСТВО ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ ПРОФИЛЯМ Часть 1 Подготовка хроматографических профилей для представления в стандартах (ISO 11024-1:1998, IDT) Настоящий проект стандарта не подлежит применению до его принятия МинскЕвразийский совет по стандартизации, метрологии и сертификации 2014Предисловие Евразийский совет по стандартизации, метрологии и сертификации (ЕАСС) представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых Государств. В дальнейшем возможно вступление в ЕАСС национальных органов по стандартизации других государств. Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 – 92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2–2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены» Сведения о стандарте 1 ПОДГОТОВЛЕН Автономной некоммерческой организацией «ПАРФЮМТЕСТ» (АНО «ПАРФЮМТЕСТ») на основе аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 4 2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации 3 ПРИНЯТ Евразийским советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол № от ) За принятие проголосовали:
4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 11024-1:1998 Essential Oils – General guidance on chromatographic profiles – Part 1: Preparation of chromatographic profiles for presentation in standards (Масла эфирные. Общее руководство по хроматографическим профилям. Часть 1. приготовление хроматографических профилей для представления в стандартах). Международный стандарт разработан техническим комитетом по стандартизации ISO/TC 217 «Косметика» Международной организации по стандартизации (ISO). В настоящем стандарте после значений единицы объема (мкл), приведенных в международном документе, дополнительно в скобках приведены значения единицы объема (мм3), пересчитанных в соответствии с единицами, установленными в межгосударственных стандартах. Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА. Перевод с английского языка (en). Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеется в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации. Степень соответствия – идентичная (IDT) 5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных (государственных) стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация также будет опубликована в сети Интернет на сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации и в каталоге «Межгосударственные стандарты» Исключительное право официального опубликования настоящего стандарта на территории указанных выше государств принадлежит национальным (государственным) органам по стандартизации этих государств Содержание1 Область применения……………………………………………………..……..2 Нормативные ссылки…………………………………………………………….3 Термины и определения…………………………………………………………4 Сущность метода……………………………………………………………….5 Пробы эфирных масел, которые подлежат испытанию………………………6 Оборудование……………………………………………………………………7 Работа устройства………………………………………………………………..8 Подготовка пробы для испытания……………………………………………..9 Определение и отбор репрезентативных и характерных компонентов эфирного масла…………………………………………………………………….10 Определение пределов концентрации……………………………………….11 Обработка результатов………………………………………………………….12 Протокол испытания……………………………………………………………Приложение А (справочное) Пример использования тестовой смеси для проверки установки газового хроматографа…………………… Приложение B (справочное) Практический пример тщательной разработки хроматографического профиля масла шалфея (Salvia officinalis L.)…………………………………………………..Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам………. МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ Масла эфирные ОБЩЕЕ РУКОВОДСТВО ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ ПРОФИЛЯМ Часть 1 Подготовка хроматографических профилей для представления в стандартах Essential Oils. General guidance on chromatographic profiles. Part 1. Preparation of chromatographic profiles for presentation in standards Дата введения – 1 Область примененияНастоящий стандарт устанавливает общее руководство по определению хроматографического профиля эфирного масла с помощью газовой хроматографии на капиллярных колонках. Хроматографический профиль является одной из характеристик эфирного масла, которая наряду с физико-химическими характеристиками позволяет выполнить оценку его качества. Она определяется на последнем этапе работы над стандартом на эфирное масло. Это не определение действительной концентрации компонентов, а только оценка их относительных долей. П р и м е ч а н и е – Информацию по использованию хроматографических профилей проб эфирных масел см. в ISO 11024-2. 2 Нормативные ссылкиДля применения настоящего стандарта необходимы следующие ссылочные документы. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного документа, для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая его изменения). ISO 356 Essential oils – Preparation of test samples (Масла эфирные. Подготовка образцов для испытаний) ISO 7609 Еssential oils - Analуsis bу gas chromatography оn capillary соlumns – Gеnеrаl method (Масла эфирные — Анализ методом газовой хроматографии на капиллярных колонках — Общий метод) 3 Термины и определенияВ настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями: 3.1 репрезентативные компоненты (representative components): Компоненты, присутствующие во всех пробах эфирного масла, вне зависимости от доли. Пример – Гернилформиат, изоментон, цитронеллол, гераниол и др. являются репрезентативными компонентами для эфирных масел герани. 3.2 характерные компоненты (characteristic components): Один или более репрезентативных компонентов, концентрация которых является характерной для данного эфирного масла П р и м е ч а н и е – Концентрация может быть нулевой. Примеры В Africa geranium гвайа-6,9-диен присутствует в незначительном количестве, а в Bourbon geranium – в большом. 10-эпи-гамма-эудесмол отсутствует в Bourbon geranium и присутствует в Africa geranium. В лаванде камфора присутствует в количестве менее 0,5 %. 3.3 типичная хроматограмма (typical chromatogram): Графическое изображение, полученное путем инъекции в хроматограф пробы эфирного масла, которое считается показательным для производства, наряду с технологическими условиями, при которых был получено масло. П р и м е ч а н и е – Хроматограмма предоставляется исключительно в ознакомительных целях. 3.4 хроматографический профиль (chromatographic profile): Перечень компонентов эфирного масла, выбранных из репрезентативных и характерных, а также предельные значения концентрации каждого из них, и, возможно, отношения таких концентраций. 4 Сущность методаПробу эфирного масла анализируют с помощью газовой хроматографии на капиллярной колонке в соответствии с ISO 7609. Выбирают репрезентативные и характерные компоненты эфирного масла. Концентрацию компонентов определяют методом нормализации пиковой области (метод внутренней нормализации в соответствии с ISO 7609). С помощью статистических методов анализа данных определяют минимальные и максимальные концентрации каждого из компонентов, а также, возможно, пределы соотношений таких концентраций. 5 Пробы эфирных масел, которые подлежат испытаниюХроматографический профиль эфирного масла определяют путем испытания большого количества проб промышленно производимых эфирных масел, которые считаются чистыми и имеют хорошие органолептические характеристики. Пробы должны быть взяты из урожая нескольких годов, и должны быть произведены из растений или частей растений, для которых известно ботаническое и, возможно, географическое происхождение, а также способ обработки. 6 Оборудование6.1 Газовый хроматограф, с инжектором, с возможностью деления потока, и капиллярной колонкой. 6.2 Пламенно-ионизационный детектор. 6.3 Система обработки данных (интегратор, калькулятор и пр.) в соответствии с указаниями, приведенными в ISO 7609. Работоспособность устройства проверяют при помощи испытания, описанного в разделе 7. 7 Работа устройства7.1 Общая информация Собирают устройство, состоящее из хроматографа и системы обработки данных (см. 6.3) таким образом, чтобы оно правильно выделяло и элюировало все летучие компоненты эфирного масла. Хроматографический профиль, полученный при испытании тестовой смеси, приведенной в таблице 1, должен отвечать хроматографическому профилю, определенному межлабораторными испытаниями (см. таблицу 2). 7.2 Подготовка и состав стандартной тестовой смеси Готовят стандартную тестовую смесь, как указано в таблице 1. (Пример использования тестовой смеси указан в Приложении А.) Таблица 1 — Подготовка и состав стандартной тестовой смеси
Проверяют чистоту каждого компонента с использованием газовой хроматографии и стандартных физико-химических методов. Хранят смесь в запечатанных бутылках в темном месте при температуре от минус 5 °C до 5 °C. При соблюдении этих условий смесь может храниться не менее года. 7.3 Проведение испытания Выполняют хроматографический анализ тестовой смеси, введя последнюю при обычных рабочих условиях для эфирных масел в лаборатории. 7.4 Результаты Результаты получают напрямую от системы обработки данных. В таблице 2 указаны формальные требования к полученным данным. Данные в процентном выражении не должны выходить за пределы диапазона. Таблица 2 — Хроматографический профиль стандартной тестовой смеси
Для пикового значения n-деканаля, соотношение сигнал/шум должно превышать 100. Соотношение можно вычислить следующим образом: - сигналом является высота пика деканаля; - шумом является половина разницы между максимальным и минимальным значением сигнала в отсутствии пика в течение 30 с. 8 Подготовка пробы для испытанияВыполняют действия согласно методу, указанному в ISO 356. 9 Определение и отбор репрезентативных и характерных компонентов эфирного маслаПроводят хроматографическую проверку всех проб эфирного масла в соответствии с методом, указанным в ISO 7609, следуя предварительно определенным требуемым процедурным условиям. Определяют главные химические компоненты, используя обычные методы анализа. Среди компонентов изучаемого эфирного масла выбирают несколько наиболее репрезентативных и характерных (не более 12). 10 Определение пределов концентрацииНастраивают интегратор таким образом, чтобы отсечь фоновый шум. Оценивают приблизительную концентрацию репрезентативных и характерных компонентов каждой пробы изучаемого эфирного масла, используя метод нормализации пиковой области (метод внутренней нормализации) в соответствии с ISO 7609. Этот метод позволяет оценить процентную долю пиковой области для каждого из компонентов по отношению к сумме областей всех пиков хроматограммы эфирного масла, которую учитывает интегратор. Это процентное значение, которое можно сопоставить с концентрацией, читается напрямую из системы данных. Для концентрации каждого из компонентов всех изучаемых проб, вычисляют математическое ожидание   и стандартное отклонение   .Принимают доверительный интервал, равный 95 %, используя уравнение:  .Все значения, которые не попадают в этот доверительный интервал, являются аномальными и подлежат исключению. Для оставшихся значений вычисляют новое математическое ожидание   и стандартное отклонение   .Определяют новый доверительный интервал, используя уравнение:  .В свою очередь, все значения, которые не попадают в этот доверительный интервал, являются аномальными и подлежат исключению. Операцию исключения выполняют до тех пор, пока на одной из итераций все значения не начнут укладываться в доверительный интервал. Значения последнего доверительного интервала формируют верхний и нижний предел допустимых концентраций. При необходимости можно определить пределы соотношения компонентов, если это позволит улучшить эффективность оценки качества. При необходимости округляют полученные значения пределов до целых или дробных чисел. В Приложении B в ознакомительных целях показан практический пример применения этого метода. 11 Обработка результатовХроматографический профиль рассматриваемого эфирного масла представляют в виде перечня компонентов эфирного масла, выбранных из репрезентативных и характерных, а также минимального и максимального значения концентрации каждого из них, и, возможно, отношения таких концентраций. 12 Протокол испытанияВ протоколе испытания указывают используемый метод и полученные результаты. Также упоминают все рабочие условия и используемые статистические методы, если они не были указаны в этой части настоящего стандарта, или те, которые названы необязательными, наряду с описанием любых инцидентов, которые могли повлиять на этот результат. В частности, протокол испытания должен включать количество проб изучаемых эфирных масел и годов, урожай которых использовался для анализа. Приложение А (справочное)Пример использования тестовой смеси для проверки установки газового хроматографаПри проверке установки используют новую колонку, новую перегородку и новую вставку. См. таблицы А.1 и А.2. Таблица А.1 — Использование определенных пиков для настройки газовой фазы хроматографической установки
Таблица A.2 — Наблюдения, выполняемые с помощью тестовой смеси
Приложение B(справочное)Практический пример тщательной разработки хроматографического профиля масла шалфея (Salvia officinalis L.)B.1 Применение пункта 5 Профиль получен путем анализа более 80 проб эфирного масла, полученных более чем за шесть лет производства из девяти различных стран. B.2 Применение пункта 7 Выбраны подходящие рабочие условия для хроматографического анализа эфирного масла и выполнена проверка работоспособности аппарата с помощью стандартной тестовой смеси. B.3 Применение пункта 9 B.3.1 Аналитическое исследование Согласно предписаниям, данным в разделе 9, аналитическое изучение 80 проб эфирного масла шалфея (Salvia officinalis L.) позволило выделить 25 компонентов, присутствующих во всех пробах:
B.3.2 Отбор проб Из 80 проб испытуемых эфирных масел, девять проб были отбракованы группой экспертов, так как их химический состав оказался отличным от состава эфирных масел шалфея (Salvia officinalis L.), считающихся чистыми и имеющими хорошие органолептические характеристики. П р и м е ч а н и е – В девяти отбракованных пробах ненормальным оказалось содержание α- и β-туйона (менее 2 %) и 1,8-цинеола (более 20 %). Причиной этому могло послужить использование в приготовлении эфирного масла шалфея другого биологического вида. B.3.3 Выбор репрезентативных компонентов Из 71 пробы эфирных масел, которые остались после отбраковки, эксперты выделили, исходя из определения в 3.1, следующие 12 компонентов, которые на их взгляд являются репрезентативными для эфирного масла шалфея (Salvia officinalis L.):
B.3.4 Выбор характерных компонентов B.3.4.1 Концентрация линалоола и линалилацетата позволяет отличить эфирное масло шалфея (Salvia officinalis L.) от масла шалфея мускатного (Salvia sclarea L.), так как в Salvia officinalis этих веществ содержится около 1 %, а в шалфее мускатном – обычно свыше 60 %. Следовательно, сочетание линалоола и линалилацетата (веществ, которые, как правило, трудно разделяются) является характерным. B.3.4.2 Анализ 1,8-цинеола позволяет отличить данное эфирное масло от масла шалфея испанского (Salvia lavandulifolia), в котором его содержится более 20 %, а в Salvia officinalis – от 5 % до 13 %. По этой причине 1,8-цинеол также является характерным компонентом. B.3.4.3 Эфирное масло Salvia officinalis является в известной степени токсичным, так как в нем присутствуют камфора и α- и β-туйон. Применение этих веществ в пищевых продуктах в Европейском союзе регулируется нормативно. Таким образом, требуется оценивать наличие этих веществ в эфирном масле. Так как β-туйон уже фигурирует в списке, приведенном выше, к нему следует добавить α-туйон и камфору. Следовательно, эти компоненты являются характерными, исходя из определения, данного в 3.2. B.3.5 Составление списка К уже выбранным 12 репрезентативным компонентам добавляют характерные компоненты, т. е. α-туйон и камфора по причине токсичности, а также линалоол и линалилацетат, чтобы отличить это масло от других. Так получают список из 16 компонентов (в нашем примере 1,8-цинеол является одновременно и репрезентативным, и характерным). Как указано в разделе 9, не рекомендуется выбирать более 12 компонентов. Следовательно, список из 16 веществ нужно сократить. Анализ показал, что можно сократить список, отбросив вещества с очень низкой концентрацией, а именно: α-терпинен  -терпинентерпинолен терпинен-4-ол а также пару «борнеол + α-терпинеол», которая является трудноразделимой при выбранных рабочих условиях. B.3.6 Выводы Хроматографический профиль шалфея (Salvia officinalis L.) составляют 10 репрезентативных и/или характерных компонентов:
B.4 Применение пункта 10 B.4.1 Определение пределов концентрации Определение соответствующих концентраций 10 репрезентативных и характерных компонентов в 71 пробе эфирного масла шалфея (Salvia officinalis L.) было выполнено используя метод нормализации пиковой области (метод внутренней нормализации) в соответствии с ISO 7609. Для концентрации каждого из компонентов было получено математическое ожидание и стандартное отклонение .Затем были получены минимальная и максимальная концентрации по формуле .Пробы, показатели которых выходили за эти пределы, были отбракованы. Было получено новое математическое ожидание и новое стандартное отклонение . Это позволило получить новые пределы, и, следовательно, отсечь значения, не укладывающиеся в эти пределы.Проведя несколько итераций, был получен результат, в котором не потребовалось отбросить ни одного значения. Из последнего полученного математического ожидания были получены верхний и нижний пределы по рассматриваемым компонентам. Эти значение были округлены. B.4.2 Пример См. таблицу B.1. Таблица B.1 — Пример ограничений допустимой концентрации
На рисунках B.1 и B.2, приведенных исключительно для ознакомления, показаны типичные хроматограммы, полученные при проведении хроматографического анализа эфирного масла шалфея (Salvia officinalis L.) методом газовой хроматографии на капиллярной колонке используя две фазы: полиэтиленгликоль 20000 (полярная фаза) и OV 1701 (аполярная фаза).
Рисунок B.1 – Типичная хроматограмма Salvia officinalis L. в полярной фазе 
Рисунок B.2 — Типичная хроматограмма Salvia officinalis L. в аполярной фазе Приложение ДА(справочное)Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартамТаблица ДА.1
УДК 665.58:006.354 МКС 71.100.60 IDT Ключевые слова: эфирные масла, хроматографический профиль, представление в стандартах | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | Руководство для студента по использованию учебного портала ... | | Руководство для преподавателей по использованию учебного портала Руководство предназначено для преподавателй Международной Академии Бизнеса, ведущих учебный процесс с применением дистанционной образовательной... |
| Правила составления и представления финансовой отчетности Общие положения Настоящие Правила устанавливают объем, периодичность, сроки и порядок составления и представления финансовой отчетности государственных... | | «Ассоциация Кызылординских предпринимателей» Ваш персональный консультант Маркетинговая консультация по теме: «Карты – как метод визуализации» Визуализация в общем смысле — метод представления информации в виде оптического изображения (например, в виде рисунков и фотографий,... |
| Варламов В. Б. Гамолко С. Н. Допризывная подготовка Планирование составлено на основании программы «Допризывная и медицинская подготовка» для X xi классов общеобразовательных учреждений... | | Модернизация деревообрабатывающего цеха Организация нового производства дверей, оконных профилей и других столярно-строительных изделий |
| Для представления в Национальный центр интеллектуальной собственности Я (мы), нижеподписавшийся(еся) | | Для представления в Национальный центр интеллектуальной собственности Я (мы), нижеподписавшийся(еся) |
| Справка о размере получаемого дохода для представления в «Приорбанк» Дана гражданину | | Советы школьного психолога. Подготовка к школе Помните, что вы выбираете школу не для себя, а для вашего ребенка, поэтому попробуйте учесть все факторы, которые могут осложнить... |