7 Хроматографический метод качественного определения (идентификации) синтетических красителей в тонком слое сорбента 7.1 Сущность метода Метод основан на сорбции красителей из раствора замороженного десерта твердым сорбентом, десорбции и удалении элюента выпариванием с последующей идентификацией красителей хроматографированием в тонком слое сорбента (ТСХ). Идентификацию красителей проводят методом сравнения значений Rf′ (отношение расстояния от центра пятна обнаруженного красителя до линии старта к расстоянию линии миграции элюента до линии старта) каждого обнаруженного красителя со значениями Rf (отношение расстояния от центра пятна стандартного синтетического красителя до линии старта к расстоянию линии миграции элюента до линии старта) контрольных образцов красителей (КО). В качестве КО используют водные растворы стандартных красителей из числа ожидаемых. 7.2 Подготовка к анализу 7.2.1 Приготовление элюентов 7.2.1.1 Приготовление элюента 1 В колбу вместимостью 50 см3 вносят пипетками, индивидуальными для каждого реактива, 3 см3 пиридина, 3 см3 изоамилового спирта, 3 см3 изобутилового спирта, 4 см3 этилового ректификованного технического спирта и 4 см3 водного аммиака. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают.
7.2.1.2 Приготовление элюента 2 В колбу вместимостью 50 см3 вносят пипетками, индивидуальными для каждого реактива, 3 см3 пиридина, 3 см3 изоамилового спирта, 3 см3 изобутилового спирта, 4 см3 этилового ректификованного технического спирта и 8 см3 водного аммиака. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают. 7.2.1.3 Приготовление элюента 3 В колбу вместимостью 50 см3 вносят пипетками, индивидуальными для каждого реактива, 6 см3 диэтиламина, 5 см3 хлороформа, 6 см3 этилового ректификованного технического спирта, 3 см3 раствора водного аммиака и 3 см3 дистиллированной воды. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают. 7.2.1.4 Приготовление элюента 4 (для красителя Зеленый S) В колбу вместимостью 50 см3 вносят пипетками, индивидуальными для каждого реактива, 6 см3 бутанола-1, 3 см3 этилового ректификованного технического спирта, 3 см3 пиридина и 6 см3 дистиллированной воды. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают. 7.2.1.5 Приготовление элюента 5 В колбу вместимостью 100 см3 вносят пипеткой 1,4 см3 водного аммиака, 8,8 см3 дистиллированной воды и отмеряют цилиндром 40 см3 этилового спирта. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают. Элюенты готовят непосредственно перед анализом. Не допускается повторное использование элюентов. 7.2.2 Приготовление водно-спиртового раствора В колбу вместимостью 250 см3 отмеряют цилиндром 50 см3 этилового спирта и 50 см3 дистиллированной воды. Закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают. Раствор используют свежеприготовленный.
7.2.3 Приготовление водно-ацетонового раствора В колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 100 см3 отмеряют цилиндром 50 см3 ацетона и 25 см3 дистиллированной воды. Колбу закрывают стеклянной пробкой и тщательно перемешивают. Раствор используют свежеприготовленный. 7.2.4 Приготовление раствора КО стандартных красителей 7.2.4.1 В стаканчике взвешивают образец стандартного красителя в соответствии с таблицей Б.1, с записью результата взвешивания в граммах до четвертого десятичного знака. Массу образца стандартного красителя m, г, рассчитывают с учетом массовой доли основного красящего вещества в образце по формуле  | (1) |
где 0,25 – масса образца красителя, при условии содержания в нем 100 % основного красящего вещества, г; 100 – коэффициент пересчета, %; X – массовая доля основного красящего вещества в образце стандартного красителя, в соответствии с приложением Б, %. 7.2.4.2 В стакан с образцом стандартного красителя, подготовленного по 7.2.4.1, прибавляют 20 см3 дистиллированной воды и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Для интенсификации растворения допускается нагревание раствора в стакане на водяной бане до температуры не более 90 °С . Затем раствор охлаждают до 20 °С, переносят количественно в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 100 см3, доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают. 7.2.4.3 Массовую концентрацию основного красящего вещества полученного раствора КО стандартного красителя Ско, г/дм3, вычисляют по формуле где 0,25 – масса образца красителя, при условии содержания в нем 100% основного красящего вещества, г; Vко – объем раствора КО стандартного красителя (Vко = 100 см3), см3; 10–3 – коэффициент пересчета см3 в дм3. Раствор КО стандартного красителя хранят в склянке из темного стекла с завинчивающейся пробкой. Срок хранения растворов КО стандартных красителей в условиях по 3.1 – не более 6 мес. 7.2.5 Приготовление растворов замороженных десертов 7.2.5.1 Приготовление раствора замороженного десерта, в состав которого входят стабилизаторы с температурой плавления студня не более 35 °С. В стакане вместимостью 100 см3 взвешивают от 5 до 10 г замороженного десерта с записью результата взвешивания до первого десятичного знака. Затем в стакан прибавляют дистиллированную воду из расчета 4 см3 на 1 г замороженного десерта, перемешивают стеклянной палочкой и нагревают на водяной бане до температуры до 35 °С. 7.2.5.2 Приготовление раствора замороженного десерта, в состав которого входят стабилизаторы с температурой плавления студня выше 35 °С В стакане вместимостью 100 см3 взвешивают от 5 до 10 г замороженного десерта с записью результата взвешивания до первого десятичного знака. Затем в стакан прибавляют ацетон из расчета 0,8 см3 на 1 г замороженного десерта и оставляют на 15 мин до полного выпадения осадка. Раствор отделяют от осадка фильтрованием на фильтрующей воронке. Осадок промывают небольшими порциями раствором по 7.2.3 из расчета от 6 до 8 см3 на 1 г замороженного десерта. С целью ускорения процесса фильтрации допускается применение колбы Бунзена и водоструйного насоса. 7.2.6 Подготовка патрона для твердофазной экстракции красителей Медицинским шприцем набирают от 10 до 20 см3 дистиллированной воды, соединяют шприц с патроном для твердофазной экстракции, заполненным сорбентом в соответствии с таблицей 1. Патрон промывают со скоростью (15 ± 5) капель дистиллированной воды в минуту. Объем пропускаемой через патрон дистиллированной воды должен быть не менее 30 см3. Затем патрон отсоединяют от шприца. В случае использования оксида алюминия патрон дополнительно промывают раствором ледяной уксусной кислоты массовой концентрации 10 г/дм3. Объем пропускаемого через патрон раствора ледяной уксусной кислоты должен быть не менее 25 см3. Т а б л и ц а 1 – Сорбенты, используемые для твердофазной экстракции красителей из растворов замороженных десертов
Наименование синтетического красителя | Индекс
| Сорбент | Азокрасители | 1 Тартразин | Е102 | Оксид алюминия, Полиамид
| 2 Желтый 2G | Е107 | 3 Желтый «солнечный закат» FCF | Е110 | 4 Азорубин | Е122 | 5 Амарант | Е123 | 6 Понсо 4R | Е124 |
Окончание таблицы 1 Наименование синтетического красителя | Индекс
| Сорбент | 7 Красный 2G | E128 |
| 8 Красный очаровательный AC | Е129 | Триарилметановые красители | 9 Синий патентованный V | E131 |
Оксид алюминия, Полиамид
| 10 Синий блестящий FCF | Е133 | 11 Зеленый S | Е142 | Полиамид
| 12 Зеленый прочный FCF | E143 | Оксид алюминия, Полиамид
| Хинолиновый краситель | 13 Желтый хинолиновый | Е104 | Оксид алюминия, Полиамид,
| Ксантеновый краситель | 14 Эритрозин | Е127 | Полиамид
|
|