Евразийский совет по стандартизации, метрологии и сертификации (еасс)
|
1. Область примененияНастоящий стандарт распространяется на соковую продукцию из фруктов и овощей, в том числе обогащенную водорастворимыми витаминами B1, B2, B6, РР, и устанавливает следующие методы определения водорастворимых витаминов в ней: - метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) с спектрофотометрическим детектированием для определения массовой концентрации (массовой доли) тиамина (B1), пиридоксина (B6) и никотинамида (ниацинамида, PP) – метод А. Диапазоны измерения массовых концентраций (массовых долей) тиамина (B1) от 1 до 30 мг/дм3 (млн-1), пиридоксина (B6) от 1 до 20 мг/дм3 (млн-1), никотинамида (PP) от 6 до 200 мг/дм3 (млн-1); - метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) с постколоночной дериватизацией и флюориметрическим детектированием для определения массовой концентрации (массовой доли) тиамина (B1) – метод Б. Диапазон измерения массовых концентраций (массовых долей) тиамина (B1) от 1 до 30 мг/дм3 (млн-1); - метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) с постколоночной дериватизацией и флюориметрическим детектированием для определения массовой концентрации (массовой доли) рибофлавина (В2) и пиридоксина (B6) – метод В. Диапазоны измерения массовой концентрации (массовой доли) витамина В2 от 1 до 30 мг/дм3 (млн-1), витамина В6 от 1 до 20 мг/дм3 (млн-1). 2. Нормативные ссылкиВ настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты: ИСО 3696–1987 Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний. ГОСТ ИСО 5725–1 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения. ГОСТ ИСО 5725–6 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике. ГОСТ ИСО/МЭК 17025–2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий. ГОСТ OIML R 76–1–2011 ГСИ. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания. ГОСТ 12.1.007–76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. ГОСТ 12.1.019–79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты. ГОСТ 12.4.021–75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования. ГОСТ 215–73 Термометры лабораторные. Технические условия. ГОСТ 245–76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный. Технические условия. ГОСТ 1770–74 (ИСО 1042–83, ИСО 4788–80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия. ГОСТ 4198–75 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия. ГОСТ 4206–75 Реактивы. Калий железосинеродистый. Технические условия. ГОСТ 4328–77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия. ГОСТ 6552–80 Кислота фосфорная. Технические условия. ГОСТ 9245–79 Потенциометры постоянного тока измерительные. Общие технические условия. ГОСТ 12026–76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия. ГОСТ 24363–80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия. ГОСТ 25336–82 Посуда и оборудование лабораторные. Типы. Основные параметры и размеры. ГОСТ 28311–89 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний. ГОСТ 29169–91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой. ГОСТ 29227–91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования. 3. Термины и определенияВ настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением: водорастворимые витамины: Группа низкомолекулярных органических соединений растворимых в воде, являющихся катализаторами химических реакций протекающих в живой клетке, и участвующие в обмене веществ, преимущественно в соединении со специфическими белками в составе ферментных систем, поступающие в организм в составе ферментов и коферментов. 4. Отбор и подготовка проб4.1 Отбор проб проводят по ГОСТ 26313. 4.2 Подготовку проб продуктов проводят по ГОСТ 31643, раздел 6.2. 4.3 Витаминные смеси (премиксы) разводят водой в таком массовом соотношении, чтобы значение массовой доли в анализируемой пробе не превышало верхней границы диапазона измерений метода. При расчете учитывают коэффициент разбавления. 4.4 Срок хранения подготовленных проб в холодильнике при температуре (4±2) С – не более 2 часов. 5. Метод определения содержания витаминов B1, B6 и PP с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектором (Метод А)5.1. Сущность методаМетод основан на разделении группы водорастворимых витаминов на твердом носителе C18, привитом на высокочистую силикагелевую основу и дополнительными полярными группами с короткой цепочкой (изопропил) по обращенно-фазовому механизму. Идентификацию и количественный расчет пиков разделенных витаминов проводят при индивидуальных для каждого максимумах светопоглощения в ультрафиолетовой области спектра сопоставлением со временем их удерживания в градуировочных растворах. Таблица 1 – Параметры идентификации витаминов B1, B6 и РР
В случае использования диодноматричного детектора, анализируя градуировочный раствор, состоящий из смеси витаминов в диапазоне длин волн, можно построить три независимые градуировки одновременно. | |||||||||||||||
