Евразийский совет по стандартизации, метрологии и сертификации (еасс)
|
5.3.1 Подготовка хроматографа к работеВключение и подготовку прибора к работе, вывод его на режим и выключение по окончании работы выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации. Перед проведением определения хроматографическую систему кондиционируют подвижной фазой до установления стабильной базовой линии в условиях и порядке, указанных в приложении Д. Для этого после вывода хроматографа на режим записывают в течение 1 часа нулевой сигнал на наиболее чувствительной шкале. Дрейф нулевого сигнала принимают равным наибольшему смещению нулевого сигнала в течение 1 часа. Полученное значение дрейфа нулевого сигнала не должно превышать значений, указанных в таблице 2 или 3. Примечание – Дрейф базовой линии больше значения, равного наибольшему смещению нулевого сигнала, указывает на проблемы с поддержанием температуры колонки или на вынос полярной фазы из колонки, или все факторы одновременно. 5.3.2 Приготовление раствора гидроксида калия с молярной концентрацией 5 моль/дм3 На лабораторных весах взвешивают 56,0 ± 0,1 г гидроксида калия в стакане вместимостью 200 см3, растворяют приблизительно в 100 см3 дистиллированной воды, охлаждают раствор до комнатной температуры при перемешивании стеклянной палочкой, затем переносят в мерную колбу вместимостью 200 см3, доводят объем раствора до метки дистиллированной водой и перемешивают. Раствор хранят в полимерной таре в течение 1 месяца в холодильнике при температуре +10 С, при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ. 5.3.3 Приготовление раствора дигидрофосфата калия с молярной концентрацией 0,05 моль/дм3 и рН 7 На лабораторных весах взвешивают 6,8 ± 0,1 г дигидрофосфата калия в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в 50 см3 дистиллированной воды, затем переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки и перемешивают. Раствор выливают в стакан вместимостью 2000 см3, опускают в него электрод и при перемешивании на мешалке доводят до pH 7,0 ± 0,1 с помощью раствора гидроксида калия с молярной концентрацией 5 моль/дм3, регистрируя показания рН-метра. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм и дегазируют под вакуумом в течение 15 мин. Раствор хранят в течение 3 дней в холодильнике при температуре +10 С, при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ и помутнения. 5.3.4 Приготовление раствора дигидрофосфата калия с молярной концентрацией 0,05 моль/дм3 и рН 3 На лабораторных весах взвешивают 6,8 ± 0,1 г дигидрофосфата калия в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в 50 см3 дистиллированной воды, затем переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем раствора дистиллированной водой до метки и перемешивают. Раствор выливают в стакан вместимостью 2000 см3, опускают в него электрод и при перемешивании на мешалке доводят до pH 3,0 ± 0,1 с помощью ортофосфорной кислоты, регистрируя показания рН-метра. Полученный раствор фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм и дегазируют под вакуумом в течение 15 мин. Раствор хранят в течение 3 дней в холодильнике при температуре +10 С, при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ и помутнения. 5.3.5 Приготовление градуировочных растворов витаминов5.3.5.1 Приготовление основного раствора витаминов (в пересчете на основание) с массовой концентрацией тиамина (витамин B1) 30,4 мг/дм3, пиридоксина (витамин B6) 20,48 мг/дм3, никотинамида (витамин PP) 192 мг/дм3 Взвешивают 0,0341 ± 0,0010 г тиамина гидрохлорида, 0,0249 ± 0,0010 г пиридоксина гидрохлорида, 0,1920 ± 0,0010 г никотинамида в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в 50 см3 дистиллированной воды, затем переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, добавляют 12,5 см3 матричного раствора (приложение А), доводят объем раствора до метки дистиллированной водой и перемешивают. Раствор устойчив в течение 7 дней при хранении в холодильнике при температуре не выше + 4 С в герметично закрытой колбе. 5.3.5.2 Готовят ряд градуировочных растворов витаминов для построения градуировочной зависимости по пяти уровням, от меньшей массовой концентрации к большей, из основного раствора в соответствии с таблицей 4. Таблица 4 – Приготовление градуировочных растворов для определения витаминов B1, B6 и PP.
Значение массовой концентрации витамина в i-том градуировочном растворе, Сiгр, мг/дм3, вычисляют по формуле  , (1)где mi – масса витамина введенного в i-тый градуировочный раствор, г; - массовая доля основного вещества в витамине, %; Vi – объем i-того градуировочного раствора, дм3. Градуировочные растворы готовят непосредственно перед выполнением измерений. |
